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日期:2022-09-01瀏覽:640次
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。
過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)重組蛋白
過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)重組蛋白
含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白
含RNA結合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白
含動力蛋白重鏈域蛋白1(DNHD1)重組蛋白
含卷曲螺旋域蛋白3(CCDC3)重組蛋白
含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)重組蛋白
核糖核酸酶A10(RNASE10)重組蛋白
核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白
核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白
核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)重組蛋白
核因子κB受體激活因子配基(RANκL)重組蛋白
黑色素瘤關聯硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)重組蛋白
紅細胞補體受體1(CR1)重組蛋白
紅細胞生成素(EPO)重組蛋白
紅細胞生成素受體(EPOR)重組蛋白
花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白
滑行蛋白α(TXLNα)重組蛋白