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更新時間:2024-11-05
兔腎動脈平滑肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腎動脈 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8427 |
細胞簡介:
兔腎動脈平滑肌分離自腎動脈組織;腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內,上行至皮質與髓質交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發出毛細血管,并向周圍的腎小體發出入球小動脈,進入腎小囊后形成球形的毛細血管網,再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網,再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,后匯合成腎靜脈經腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養血管,又是腎的機能血管,與腎泌尿機能密切相關。腎動脈在腎實質內形成兩個毛細血管網:腎小球毛細血管網,血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細血管網,血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動脈平滑肌細胞是腎動脈的重要結構細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。腎動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介:
實驗室分離的兔腎動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔腎動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔腎動脈平滑肌體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
人載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒
人載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒
人載脂蛋白C3(APO-C3)試劑盒
人載脂蛋白C2(Apo-C2)試劑盒
淀粉樣肽前體蛋白抗體
缺氧誘導基因1B蛋白抗體
KNG1重組小鼠 KNG1 / BDK / kininogen-1 蛋白 Protein
Beta-Amyloid 1-42 CT β淀粉樣肽 1-42 (C端多肽 0.1mgBeta-Amyloid 1-42 CT β淀粉樣肽 1-42 (C端多肽)
SCN3B重組人 SCN3B 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ITGA6 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
SLC3A2 Protein Rat 重組大鼠 SLC3A2 / 僀?僀
Beta-Amyloid 1-42 CT β淀粉樣肽 1-42 (C端多肽 0.1mgBeta-Amyloid 1-42 CT β淀粉樣肽 1-42 (C端多肽)
ITGA6 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
KNG1重組小鼠 KNG1 / BDK / kininogen-1 蛋白 Protein
SLC3A2 Protein Rat 重組大鼠 SLC3A2 / CD98 蛋白
SCN3B重組人 SCN3B 蛋白 (Fc 標簽) Protein
豚鼠白介素1β(IL1B)試劑盒 ,英文名: IL1B ELISA Kit
Human ubiquitin conjugating enzyme (E2/UBCE) ELISA Kit 人泛素結合酶(E2/UBCE)試劑盒
rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit 兔子白介素6(IL-6)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforBeta-CG(HumanChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit人絨毛膜β
細菌乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量試劑盒20次
rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit兔子促卵泡素(FSH)試劑盒規格:96T/48T
兔腎動脈平滑肌細胞人優球蛋白(EL)ELISA 試劑盒
Human ansforming growth factor alpha (TGF- alpha) ELISA Kit 人轉化生長因子α(TGF-α)試劑盒
HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORsELISAKit 人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)pcr檢測試劑盒分裝
HumanIerferonαAibody,IFNα-Ab試劑盒人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)試劑盒規格:96T/48T
組織精(arginine)含量酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次
Humanisociatedehydrogenase,ICDELISAKit人異檸檬酸脫氫酶(ICD)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行