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更新時間:2024-11-04
小鼠牙髓干細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
牙髓 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8039 |
細胞簡介:
小鼠牙髓干分離自牙髓組織;牙髓組織位于牙齒內部的牙髓腔內。牙髓腔的外形與牙體形態大致相似,牙冠部髓腔較大,稱髓室,牙根部髓腔較細小,稱根管,根尖部有小孔,稱根尖孔。牙髓組織主要包含神經、血管,淋巴和結締組織,還有排列在牙髓外周的造牙本質細胞,其作用是造牙本質。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機體抵抗力的差異,出現不同的病理變化,在臨床上會表現為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續時間較長后,轉化為急性牙髓炎癥。間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織,具有很強的自我復制和多向分化潛能,具有向脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力,運用 MSCs來修復軟骨損傷具有很好的應用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質干細胞。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠牙髓干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠牙髓干經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:基礎培養基,含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠牙髓體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠(NO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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小鼠血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human mucin (ORM) ELISA Kit 人類粘蛋白(ORM)試劑盒
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CTDSPL蛋白抗體
蛋白激酶C相關激酶1抗體
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AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1 0.5mgAMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗原
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標簽) Protein
CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白
LILRA5 Protein Rat 重組大鼠 LILRA5 蛋白
半乳糖凝集素3(GAL3)重組蛋白 Recombinant Galectin 3 (GAL3)
CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白
MFI2重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白 Protein
SIRPG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 (Fc 標簽)
IL11重組人 IL11 / Interleukin 11 / IL-11 蛋白 Protein
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Porcine acetylcholine (ACh) ELISA Kit 豬乙酰(ACh)試劑盒
ELISA 小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2) 進口分裝
CLIAKitforLPAg(HumanLegionellapneumophilaaigen)ELISAKit人軍團菌抗原
通用型CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitIL-1β雞白介素1β
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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