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更新時間:2024-11-05
人真皮毛乳頭細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
毛囊 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8312 |
細胞簡介:
人真皮毛乳頭分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細胞連續形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭,中心是一根毛發,立毛肌的一側斜附在毛囊壁上,附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結構比較復雜的器官附件組織。毛囊實際上是由結締組織和上皮兩部分所組成,除了具有結締組織和血管的真皮乳頭(毛乳頭)外,毛囊其余部分都是由表皮細胞分化而來。真皮毛乳頭細胞位于毛囊基底部,是一類成纖維細胞。在毛囊發育早期,真皮細胞向單層上皮細胞發出真皮信號,刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細胞向下方的真皮發出表皮信號,誘導其形成有成纖維細胞組成的凝集細胞團。在此過程中,毛母質細胞逐漸包裹凝集細胞團,形成成熟的真皮毛乳頭細胞。作為毛囊中的重要細胞群,真皮毛乳頭細胞的分子機制和臨床應用正在被逐漸認識和解析。
方法簡介:
實驗室分離的人真皮毛乳頭采用膠原酶 - 混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的人真皮毛乳頭經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養基:含FBS、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人真皮毛乳頭體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠基轉移酶(ALT)試劑盒 96T/48T
小鼠表皮生長因子(EGF)試劑盒 96T/48T
小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)試劑盒 96T/48T
小鼠交聯物(PY)試劑盒 96T/48T
小鼠基質裂解素(ST2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human epithelial cell adhesion molecule (Ep-CAM/CD362) ELISA Kit 人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)試劑盒
Humanlymphotoxinβ,LTBELISAKit 人淋巴毒素β(LTB)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactoraibody,GM-CSFAb試劑盒人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSFAb)試劑盒規格:96T/48T
植物亮氨基肽酶(leucineaminopeptidase;LAP)電泳分析試劑盒5次
Humanvinculin,VCLELISAKit人紐蛋白(VCL)試劑盒規格:96T/48T
P53應答基因蛋白5抗體
通用轉錄因子IIF亞基2/TFIIF RAP 30抗體
XCL1重組食蟹猴 XCL1 蛋白 Protein
MMP-17(Matrix metalloproteinase-17 0.5mgMMP-17(Matrix metalloproteinase-17) 基質金屬蛋白酶-17抗原
KRAS重組人 K-Ras / K-Ras 蛋白 Protein
EPHA2 Protein Human 重組人 EphA2 蛋白
METRN Protein Mouse 重組小鼠 Meteorin / METRN 蛋白 (Fc 標簽)
MMP-17(Matrix metalloproteinase-17 0.5mgMMP-17(Matrix metalloproteinase-17) 基質金屬蛋白酶-17抗原
EPHA2 Protein Human 重組人 EphA2 蛋白
XCL1重組食蟹猴 XCL1 蛋白 Protein
METRN Protein Mouse 重組小鼠 Meteorin / METRN 蛋白 (Fc 標簽)
KRAS重組人 K-Ras / K-Ras 蛋白 Protein
人真皮毛乳頭細胞大鼠γ干擾素受體(IFN-γR)試劑盒 ,英文名: IFN-γR ELISA Kit
Mouse iestinal fatty acid binding protein (iFABP) ELISA Kit 小鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒
ELISA 小鼠巨嗜細胞性蛋白-3a(mouse MIP-3a) 進口分裝
CLIAKitforIL1RaELISAKit大鼠白介素1受體拮抗劑
通用型賴(lysine)含量熒光定量試劑盒20次
ELISAKitSAA大鼠血清淀粉樣蛋白A