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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠乳腺成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠乳腺成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：金屬磷酸酯酶1抗體 鋅指蛋白639抗體 原肌球蛋白調(diào)節(jié)蛋白4抗體 小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞 大鼠腦微血管周細(xì)胞 Raw2647,C17細(xì)胞 人腎癌細(xì)胞+LUC;SN12-PM6-LUC
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：1089
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠乳腺成纖維細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
乳腺組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7560 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠乳腺成纖維分離自乳腺組織；乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間，淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動(dòng)物少數(shù)可以重復(fù)經(jīng)歷生長(zhǎng)、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結(jié)締組織伸入乳腺組織之間，形成許多間隔，這些纖維結(jié)締組織對(duì)乳房起固定作用，而纖維結(jié)締組織是由成纖維細(xì)胞構(gòu)成的。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠乳腺成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠乳腺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
勻漿制作或抽提 Homogenate production or exaction
（皮膚骨骼肌腸肌肉等難勻特殊樣品） (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)
超氧化物歧化酶（SOD）檢測(cè) Superoxide dismase (SOD) detection
二（MDA）檢測(cè) Malondialdehyde (MDA) detection
植物(ETH)ELISA 試劑盒
Human ai parainfluenza virus IgM aibody (ai-PIV IgM) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgM抗體(ai-PIV IgM)試劑盒
PorcineImmunoglobulinG,IgGELISAKit 豬免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAFUELISAKit大鼠αL巖藻糖苷酶
血液唾液酸(SA)比色法定量試劑盒50次
MouseThyroid-Peroxidase,TPOELISAKit小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒
PE-Cy5標(biāo)記人CD57單克隆抗體
G蛋白偶聯(lián)受體171抗體
IL1A重組人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白 Protein
松弛肽(RLN)重組蛋白 Recombinant Relaxin (RLN)
NCAM2重組人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACBD6 Protein Human 重組人 ACBD6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
松弛肽(RLN)重組蛋白 Recombinant Relaxin (RLN)
ACBD6 Protein Human 重組人 ACBD6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL1A重組人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NCAM2重組人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠乳腺成纖維細(xì)胞大鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)試劑盒 ，英文名： SFRP4 ELISA Kit
Rat betacellulin (BTC) ELISA Kit 大鼠β細(xì)胞素(BTC)試劑盒
Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforDPPIVELISAKit大鼠二肽基肽酶Ⅳ
細(xì)胞葡萄糖激酶(glucosekinase)比色法定量試劑盒20次
Rathepaticlipase,HLELISAKit大鼠肝脂酶(HL)試劑盒
