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更新時間:2025-04-09
人腹膜毛細血管內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腹膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7306 |
細胞簡介:
人腹膜毛細血管內皮分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細胞和間質(結締組織、纖維、毛細血管、淋巴管)構成,藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經組織經由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積、配布最復雜的漿膜,由皮及少量結締組織構成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續、移行,共同圍成不規則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜的主要生理功能:①分泌功能;②吸收功能;③再生能力;④防御功能;⑤調理功能。臟、壁腹膜都有豐富的毛細血管,毛細血管上有不同的孔徑;腹膜的毛細血管和毛細血管后靜脈是進行溶質交換的主要場所。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人腹膜毛細血管內皮采用膠原酶-聯合消化法結合化學試劑抑制法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人腹膜毛細血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠乙型肝表面抗體(HBsAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠氧化酶(DAO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat catecholamine (CA) ELISA Kit 大鼠兒茶酚胺(CA)試劑盒
Humanβ-glucosidaseELISAKit 人β葡糖苷酶(β-glucosidase)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor乙型肝二對半全套
營養補充劑L-天化學比色法定量試劑盒20次
MouseIerleukin11,IL-11ELISAKit小鼠白介素11(IL-11)試劑盒規格:96T/48T
腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體
中性酯水解酶1抗體
LIFR重組人 LIFR / CD118 蛋白 Protein
血紅蛋白μ(HBμ)重組蛋白 Recombinant Hemoglobin Mu (HBm)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
CD3D Protein Human 重組人 CD3d / CD3 delta 蛋白
GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標簽)
血紅蛋白μ(HBμ)重組蛋白 Recombinant Hemoglobin Mu (HBm)
CD3D Protein Human 重組人 CD3d / CD3 delta 蛋白
LIFR重組人 LIFR / CD118 蛋白 Protein
GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標簽)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
人腹膜毛細血管內皮細胞大鼠氧化酶(DAO)試劑盒 ,英文名: DAO ELISA Kit
Porcine coisol (Coisol) ELISA Kit 豬(Coisol)試劑盒
特定基因序列(Deer)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforM2-PK(HumanPyruvateKinase)ELISAKit人同酸激酶M2型同工酶
體液總膽汁酸酶連續循環比色法定量試劑盒20次
ELISAKitACAC雞乙酰乙酸檢測