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更新時間:2025-04-09
人滑膜成纖維細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
滑膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7698 |
細胞簡介:
人滑膜成纖維分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構,各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構,同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎(OA)以關節軟骨退行性變為特征,其病理改變累及關節的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的細胞群體,是維持關節正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無定性的基質中,基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人滑膜成纖維采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人滑膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠白介素 -5 (mouse IL-5) 作用: ELISA 規格: 96T 美國 Biosource
小鼠白介素 -6 (mouse IL-6) 作用: ELISA 規格: 96T 法國 Diaclone
小鼠白介素 -7(mouse IL-7) 作用: ELISA 規格: 96T 美國 R&D
小鼠白介素 -10 (mouse IL-10) 作用: ELISA 規格: 96T 法國 Diaclone
小鼠壞死因子相關凋亡誘導配體4(AIL-R4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai myocardial aibody (AMA) ELISA Kit 人抗心肌抗體(AMA)試劑盒
HumanCyclophosphamide,CTXELISAKit 人對環0酰胺(CTX)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforACA/CENP(HumanAicenomereAibody)ELISAKit人抗著絲點抗體
一步法-PCR試劑盒20/50次
MouseOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAKit小鼠骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)試劑盒規格:96T/48T
乳腺癌易感基因環狀結構域蛋白抗體
20號染色體開放閱讀框106抗體
SELL重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein
MBP (Myelin Basic Protein, Rat 0.5mgMBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘堿性蛋白(多肽)大鼠
IFNL1重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein
ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977)
APOA1 Protein Mouse 重組小鼠 ApoA1 蛋白
MBP (Myelin Basic Protein, Rat 0.5mgMBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘堿性蛋白(多肽)大鼠
ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977)
SELL重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein
APOA1 Protein Mouse 重組小鼠 ApoA1 蛋白
IFNL1重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein
人滑膜成纖維細胞大鼠血管內皮生長因子B(VEGFB)試劑盒 ,英文名: VEGFB ELISA Kit
Mouse iact parathyroid hormone (i-PTH) ELISA Kit 小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒
Mousesolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAkit 小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforhumanAzidothymidine,AZTELISAKit人
細胞EPHA3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPKB大鼠蛋白激酶B