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更新時間:2024-10-31
兔肝竇內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
肝臟 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8010 |
細胞簡介:
兔肝竇內皮分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內皮細胞(SEC)是肝臟內所占比例最高的非實質細胞,位于肝竇腔與肝細胞之間,具有物質轉運、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細胞所沒有的窗孔結構、細胞間連結松散、內皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時,肝竇內皮細胞窗孔逐漸減少或消失,內皮下基膜形成,產生類似于連續型毛細血管的結構,這一過程稱為肝竇毛細血管化。它由多種因素引起,其過程極復雜,在多種肝病的發病前期階段均有出現,近年來受到廣泛關注。
方法簡介:
實驗室分離的兔肝竇內皮采用混合酶灌流消化、反復低速離心、密度梯度離心法,并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔肝竇內皮經CD31或CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔肝竇內皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
水飽和酚 10x250ml
Phenol,WaterSaturated,pH5.3
0酰二肽 10x250ml
Phosphoramidon
豚鼠乙型肝病毒表面抗體(HBsAb)試劑盒 ,英文名: HBsAb ELISA Kit
Human protein tyrosine phosphatase (PTP/PTPase/CD148) ELISA Kit 人蛋白酪0酸酶(PTP/PTPase/CD148)試劑盒
MonkeyEndothelin1,ET-1ELISAKit內皮素1(ET-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBMP-4ELISAKit大鼠骨成型蛋白4
細菌明膠瓊脂平板50個
rabbitmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISAKit兔子基質金屬蛋白酶4(MMP-4)試劑盒規格:96T/48T
J-chain重組兔單克隆抗體
激活素受體相互作用蛋白4抗體
AMIGO2重組人 AMIGO2 蛋白 Protein
streptomycin/BSA 偶聯牛血清白蛋白 2mgstreptomycin/BSA 偶聯牛血清白蛋白
TACSTD2重組人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 Protein
IGFLR1 Protein Human 重組人 IGFLR1 / TMEM149 蛋白 (Fc 標簽)
TGFBR2 Protein Human 重組人 TGFBR2 蛋白 (His & Fc 標簽)
streptomycin/BSA 偶聯牛血清白蛋白 2mgstreptomycin/BSA 偶聯牛血清白蛋白
IGFLR1 Protein Human 重組人 IGFLR1 / TMEM149 蛋白 (Fc 標簽)
AMIGO2重組人 AMIGO2 蛋白 Protein
TGFBR2 Protein Human 重組人 TGFBR2 蛋白 (His & Fc 標簽)
TACSTD2重組人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 Protein
兔肝竇內皮細胞大鼠末端補體復合體C5b-9(C5b-9)試劑盒 ,英文名: C5b-9 ELISA Kit
Monkey ierleukin 1 (IL-1) ELISA Kit白介素1(IL-1)試劑盒
RatComplemefragme4a,C4aELISAKit 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforA1cELISAKit大鼠糖化血紅蛋白A1c
細胞甘油-3-0酸脫氫酶(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase)總活性比色法定量試劑盒20次
RatsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISAKit大鼠可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)試劑盒規格:96T/48T