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更新時間:2024-11-04
兔胎盤間充質干細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
胎盤 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8134 |
細胞簡介:
兔胎盤間充質分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育,依靠胎盤從母體取得營養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。胎盤間充質干細胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一種多能干細胞,是具有自我復制能力的多潛能細胞。在一定條件下,它可以分化成多種功能細胞像APSC多能細胞。在胚胎發育中來源于中胚層。在機體正常的組織損傷修復過程中,MSC是一種重要的參與組織再生的細胞庫。在組織損傷引起的特殊信號作用下,MSC遷移到受損部位,在局部聚集增殖,依據不同的損傷信號沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴增,體外倍增能力旺盛,能保持其多向分化能力。因此,MSC是一種實用的組織修復種子細胞。相較于其他干細胞,胎盤間充質干細胞具有來源方便,細胞數量充足,易于分離、培養、擴增和純化,傳代擴增多代后仍具有干細胞特性。胎盤是干細胞的優良來源。
方法簡介:
實驗室分離的兔胎盤間充質干采用-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔胎盤間充質干經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內狀態優良
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔胎盤間充質干體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠絨毛膜(CG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠二(MDA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠C肽(C-Peptide)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit E(IgE)試劑盒
HumanAquaporin3,AQP-3ELISAKit 人水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Equineamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40試劑盒馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母NAD依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量試劑盒20次
MouseCrosslaps,CrELISAKit小鼠骨膠原交聯(Cr)試劑盒規格:96T/48T
AF647標記的信號轉導和轉錄激活因子5抗體
趨化因子26/嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體
Spike重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 標簽) Protein
TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)
IL10RB重組人 IL10Rb 蛋白 Protein
CNPY3 Protein Human 重組人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 標簽)
NTRK3 Protein Human 重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 標簽)
TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)
CNPY3 Protein Human 重組人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 標簽)
Spike重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 標簽) Protein
NTRK3 Protein Human 重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 標簽)
IL10RB重組人 IL10Rb 蛋白 Protein
兔胎盤間充質干細胞大鼠間羥(MN)試劑盒 ,英文名: MN ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒
RatADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFETU-A(HumanFetuinA)ELISAKit人胎球蛋白A
細胞基質金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次
RatOncostatin-M,OSMELISAKit大鼠抑瘤素M(OSM)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行