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更新時間:2024-11-04
小鼠大隱靜脈內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
大隱靜脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7287 |
細胞簡介:
小鼠大隱靜脈內皮分離自大隱靜脈;大隱靜脈起于足背靜脈弓內側端,經內踝前方,沿小腿內側緣伴隱神經上行,經股骨內側髁后方,進入大腿內側部,與股內側皮神經伴行,逐漸向前上,在恥骨結節外下方穿隱靜脈裂孔,匯入股靜脈,其匯入點稱為隱股點。有5條屬支:旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內側淺靜脈和股外側淺靜脈,它們匯入大隱靜脈的形式多樣,相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結扎時,須分別結扎、切斷各屬支,以防復發。大隱靜脈內皮細胞對維持大隱靜脈動態平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調節因子;大隱靜脈內皮細胞還釋放控制細胞增殖和調節血管壁緊張度的分子。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠大隱靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠大隱靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
總合成酶(NOS)測試盒[測總NOS(T-NOS)]
(NO)測定試劑盒(微板法)
(NO)測定試劑盒(還原酶法)
ATP酶測試盒(測普通組織勻漿的Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶,樣本前處理不需高速離心)
豬組胺(HIS)ELISA 試劑盒
Human lipid peroxide / lactoperoxidase (LPO) ELISA Kit 人過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)試劑盒
RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforApo-E(MouseApolipoproteinE)ELISAKit小鼠載脂蛋白E
溴脫氧尿核苷(BrdU)溶液(1毫摩爾)1毫升
PorcineMelatonin,MTELISAKit豬褪黑素(MT)試劑盒
NDUFAF1蛋白抗體
先天性紅細胞生成異常性貧血蛋白1抗體
IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
Lin-28同源物A(LIN28A)重組蛋白 Recombinant Lin-28 Homolog A (LIN28A)
RCN3重組人 RCN3 蛋白 (His 標簽) Protein
C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標簽)
GPT Protein Rat 重組大鼠 GPT1 / GPT 蛋白 (His 標簽)
癌胚抗原(CEA)重組蛋白 Recombinant Carcinoembryonic Antigen (CEA)
C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標簽)
BCAM重組小鼠 BCAM 蛋白 (His 標簽) Protein
FGFR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (His 標簽)
GSTZ1重組人 GSTZ1 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠大隱靜脈內皮細胞大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒 ,英文名: NF-κB p65 ELISA Kit
Rabbit heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 兔熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒
麻疹病毒(MV)核酸試劑盒(-PCR法) 48T
CLIAKitforMouseBeta-Defensins,Beta-DFELISAKit小鼠β-防御素
體液肌酸激酶(CK)總活性比色法定量試劑盒25次
ELISAKit1,3-βDglucosidase人1,3-βD葡葡糖苷酶
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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