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更新時間:2024-11-04
小鼠腦動脈血管平滑肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腦動脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7336 |
細胞簡介:
小鼠腦動脈血管平滑肌分離自腦動脈組織;腦動脈有成對的頸內動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環;靜脈系多不與同名動脈拌行,所收集的靜脈血優良入靜脈竇再匯入頸內靜脈;各級靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動脈系統和腦的靜脈系統。腦動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腦動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腦動脈血管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
中文名稱 方法 規格
小鼠多巴胺(DA)ELISAKit ELISA.
小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISAKit ELISA.
小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISAKit ELISA.
豬補體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒
Human Legionella aibody IgM (LP Ab-IgM) ELISA Kit 人軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM )試劑盒
PorcineGlucoseanspoer2,GL2ELISAKit 豬葡萄糖轉運蛋白2(GL2)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforALK(Humananapasticlymphomakinase)ELISAKit人間變性淋巴瘤激酶
血液卵0脂乙酰轉移酶(LCAT)活性熒光定量試劑盒20次
MousevonWillebrandFactor,vWFELISAKit小鼠血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(vWF)試劑盒
FITC標記人CD123單克隆抗體
ATP酶H+轉運溶酶體輔助蛋白2抗體
IL13重組小鼠 IL13 / ALRH 蛋白 Protein
二氫轉乙酰基酶(DLAT)重組蛋白 Recombinant Dihydrolipoyl Transacetylase (DLAT)
NRN1L重組人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 蛋白 Protein
ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標簽)
CD38 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SCARB3 蛋白
肌肌酸激酶(CKM)天然蛋白 Native Creatine Kinase, Muscle (CKM)
ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標簽)
PDGFC重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白 Protein
TEK Protein Rat 重組大鼠 Tie2 / TEK 蛋白
SLITRK6重組人 SLITRK6 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠腦動脈血管平滑肌細胞大鼠肝配蛋白B受體3(EPHB3)試劑盒 ,英文名: EPHB3 ELISA Kit
Rat alpha L fucosidase (AFU) ELISA Kit 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒
RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 大鼠白細胞分化抗原30(CD30)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforE2ELISAKIT魚雌二醇
細胞培養污染性支原體M.hominis鑒定16SrDNAPCR擴增試劑盒20次
Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit大鼠誘導型合成酶(iNOS)試劑盒
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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