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更新時間:2024-11-04
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產品名稱:小鼠腦靜脈血管平滑肌細胞
組織來源:腦靜脈組織
產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
小鼠腦靜脈血管平滑肌分離自腦靜脈組織;與腦動脈相比,腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同,腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣,靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為:大部腦靜脈血經腦深部靜脈和腦血竇流入頸內靜脈;小部腦靜脈血經眼部翼狀靜脈叢,進入靜脈導血管再到頭皮,最后流入椎管中的椎旁靜脈系統。腦靜脈系統有大量交通枝靜脈叢,即使兩側頸內靜脈都被阻塞,大腦靜脈血仍可經椎靜脈和頸外靜脈系統完成其回流。腦靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腦靜脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腦靜脈血管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產品:
小鼠血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 96T/48T
小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)試劑盒 96T/48T
小鼠血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)試劑盒 96T/48T
小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)試劑盒 96T/48T
小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat testoterone ELISA Kit (T) 大鼠睪酮(T)試劑盒
Humanamiodarone,ADELISAKit 人呋酮(AD)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenC-ReactiveProtein,CRP試劑盒雞C反應蛋白(CRP)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞CASPASE-2蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
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FITC標記小鼠CD47單克隆抗體
BCL2樣12含脯蛋白抗體
CD38重組人 SCARB3 蛋白 Protein
胰島素樣生長因子2-mRNA結合蛋白3(IGF2BP3)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3)
NA重組甲型流感 H1N1 神經酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
CD86 Protein Human 重組人 CD86 / B7-2 蛋白
Shiga toxin II subunit B Protein E. coli 重組腸出血性大腸桿菌 (EHEC) stx2B / Shiga toxin II subunit B 蛋白
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Pig superoxide dismase (SOD) ELISA Kit 豬超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒
流行性腮腺病毒(MV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforM-CSF(MouseMacrophageColony-StimulatingFactor)ELISAKit小鼠巨噬細胞集落刺激因子
體液氏菌(SalmonellaTyphi)定性試劑盒20次
ELISAKitMHC綿羊主要組織相容性復合體
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養瓶內培養基,預留5ml左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
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