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更新時間:2024-11-05
小鼠棕色脂肪干細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
脂肪組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7664 |
細胞簡介:
小鼠棕色脂肪干分離自棕色脂肪組織;動物體內存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,負責儲存多余熱量;棕色脂肪負責分解引發肥胖的白色脂肪,將后者轉化成二氧化碳、水和熱量,本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,其特點是組織中有豐富的毛細血管,脂肪細胞內散著許多小脂滴,線粒體大而豐富,核圓形,位于細胞中央,這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少,新生兒及冬眠動物較多,在新生兒主要分布在肩胛間區、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發揮作用,它們堆積在新生兒肩胛處,幫助維持體溫。隨著年齡增長,棕色脂肪會逐漸消失。最終,動物體內只殘存少量棕色脂肪細胞,分布于頸部和鎖骨。脂肪干細胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能的干細胞,主要恢復組織細胞的修復功能,促進細胞的再生,恢復年輕面容的同時,身體機能也得到充分改善,有效改善亞健康、早衰等疾病,由內而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優點:①具有自我更新及多向分化的潛能;②來源充足;③對供區的創傷較小;④獲得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應用于組織工程領域中理想的種子細胞。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪干采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪干經CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒 96T/48T
兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒 96T/48T
兔子抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)試劑盒 96T/48T
兔子巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素28(IL-28)試劑盒 96T/48T
Rat chorionic gonadoophin (CG) ELISA Kit 大鼠絨毛膜(CG)試劑盒
Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancarbonicanhydrase2,CA-2試劑盒人酶2(CA-2)試劑盒規格:96T/48T
重組腺病毒包裝試劑盒1套
HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit人可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒規格:96T/48T
NAD(P)H 苯醌脫氫酶 2抗體
核輸出蛋白5抗體
GP140重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標簽) Protein
Tie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪激酶1抗原 0.5mgTie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪激酶1抗原
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 標簽) Protein
GGT5 Protein Human 重組人 GGT5 / GGTLA1 蛋白 (ECD, His 標簽)
LDLR Protein Human 重組人 LDLR / LDL Receptor 蛋白
Tie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪激酶1抗原 0.5mgTie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪激酶1抗原
GGT5 Protein Human 重組人 GGT5 / GGTLA1 蛋白 (ECD, His 標簽)
GP140重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標簽) Protein
LDLR Protein Human 重組人 LDLR / LDL Receptor 蛋白
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 標簽) Protein
小鼠棕色脂肪干細胞大鼠成纖維細胞生長因子10(FGF10)試劑盒 ,英文名: FGF10 ELISA Kit
Mouse C reactive protein (CRP) ELISA Kit 小鼠C反應蛋白(CRP)試劑盒
ELISA 小鼠肌酸激酶(mouse CK) 進口分裝
CLIAKitforLensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素
通用型HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitapo-A1猴載脂蛋白A1